2024年1月25日，復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院舒易來(lái)、李華偉、王武慶，哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院陳正一、東南大學(xué)柴人杰等在國(guó)際頂尖醫(yī)學(xué)期刊《柳葉刀》(The Lancet)上發(fā)表了題為：AAV1-hOTOF gene therapy for autosomal recessive?deafness 9: a single-arm trial?的研究論文。派真生物很榮幸能夠?yàn)樵撗芯刻峁〢AV病毒包裝服務(wù)，助力先天性耳聾AAV基因療法進(jìn)展，推動(dòng)遺傳性耳聾基因治療藥物的研發(fā)到臨床轉(zhuǎn)化。

這項(xiàng)在6名因OTOF雙等位基因突變而聽(tīng)力嚴(yán)重障礙的患兒中進(jìn)行的臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，AAV1-hOTOF作為一種常染色體隱性遺傳性耳聾的新型基因療法，具有良好的安全性和有效性。6名接受治療的患兒中有5人獲得了穩(wěn)健的聽(tīng)力恢復(fù)和語(yǔ)言感知能力的改善。這些結(jié)果支持在常染色體隱性耳聾患兒中進(jìn)行進(jìn)一步的基因治療研究。

腺相關(guān)病毒(AAV)上目前最廣泛使用的體內(nèi)基因治療遞送載體，其安全性已經(jīng)在臨床上得到了廣泛驗(yàn)證。基于AAV載體的基因療法非常適合內(nèi)耳疾病治療，AAV可以直接向內(nèi)耳細(xì)胞局部遞送，而不必暴露于體內(nèi)的其他組織，減少潛在風(fēng)險(xiǎn)。此外，內(nèi)耳毛細(xì)胞不分裂，因此，通過(guò)AAV遞送進(jìn)去的基因可以長(zhǎng)期持續(xù)表達(dá)，從而產(chǎn)生持久的治療效果。

但AAV-OTOF基因療法時(shí)還面臨著一個(gè)挑戰(zhàn)，AAV能夠裝載的DNA片段的長(zhǎng)度不超過(guò)4.7kb，而OTOF基因的編碼區(qū)長(zhǎng)度接近6kb(5994bp)，超過(guò)了AAV載體的裝載極限。

研究團(tuán)隊(duì)此前在小鼠實(shí)驗(yàn)中證實(shí)，使用雙AAV載體分別遞送Otof基因的一部分，成功恢復(fù)了Otof基因敲除鼠模型的聽(tīng)覺(jué)功能。然后，研究團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)了基于AAV1-hOTOF的基因療法，使用毛細(xì)胞特異性啟動(dòng)子啟動(dòng)hOTOF的表達(dá)，并在小鼠和非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物中驗(yàn)證了安全性。

研究團(tuán)隊(duì)隨后啟動(dòng)了一項(xiàng)單臂臨床試驗(yàn)(臨床試驗(yàn)注冊(cè)號(hào)為ChiCTR2200063181)，以調(diào)查AAV1-hOTOF基因療法在常染色體隱性遺傳耳聾9型兒童患者中的安全性和有效性。該試驗(yàn)納入了6名因OTOF雙等位基因突變而患有嚴(yán)重聽(tīng)力障礙或聽(tīng)力完全喪失，且未接受雙側(cè)人工耳蝸植入的兒童。研究團(tuán)隊(duì)向他們的耳蝸單次注射了AAV1-hOTOF，該試驗(yàn)的主要終點(diǎn)為注射后6周的劑量限制性毒性。還將評(píng)估治療后的聽(tīng)覺(jué)功能和語(yǔ)言能力。

每個(gè)參與者的基線特征、基因型和接受的治療劑量

在這6名接受AAV1-hOTOF基因治療的患兒中，1人接受的劑量為9×1011?vg，其余5人接受的劑量為1.5×1012?vg。所有6名患兒完成26周的隨訪。整個(gè)過(guò)程沒(méi)有發(fā)生劑量限制性毒性或嚴(yán)重不良事件。共總共觀察到48起不良事件，其中46起(96%)為1至2級(jí)不良事件，2起(4%)為3級(jí)不良事件(1名患者的中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)下降)。

6名接受治療的患兒中，有5人的聽(tīng)力得到恢復(fù)，表現(xiàn)為0.5-4.0 kHz的平均聽(tīng)性腦干反應(yīng)(ABR)閾值降低了40-57分貝。在接受9×1011?vg劑量的患兒中，平均ABR閾值從基線的大于95分貝改善到治療后4周時(shí)的68分貝、13周時(shí)的53分貝和26周時(shí)的45分貝。在接受1.5×1012?vg劑量的參與者中，平均ABR閾值從基線的大于95分貝，改善到治療后26周時(shí)的48分貝、38分貝、40分貝和55分貝。

內(nèi)耳注射AAV1-hOTOF前后聽(tīng)力測(cè)試

先天性耳聾兒童由于無(wú)法聽(tīng)到說(shuō)話的聲音，因此，他們?cè)趯W(xué)習(xí)口語(yǔ)時(shí)會(huì)遇到困難，在聽(tīng)力恢復(fù)后，他們能夠逐漸獲得語(yǔ)言感知能力。因此，除了客觀的聽(tīng)力測(cè)試外，語(yǔ)言感知也是聽(tīng)力損失兒童聽(tīng)力恢復(fù)的重要指標(biāo)。該研究顯示，治療后聽(tīng)力得到恢復(fù)的5名患兒的語(yǔ)言感知能力均得到了改善。

據(jù)悉，這項(xiàng)臨床研究于2022年12月治療了第一位患者，這是第一個(gè)、也是迄今為止治療患者最多、隨訪時(shí)間最長(zhǎng)的基因療法治療遺傳性耳聾的人體臨床試驗(yàn)。

舒易來(lái)醫(yī)生表示，AAV1-hOTOF基因治療的耐受性和安全性良好，而且?guī)椭藥酌純猴@著改善了聽(tīng)力。平均而言，他們從聽(tīng)不到95分貝(相當(dāng)于摩托車(chē)的聲響)以下的聲音到現(xiàn)在可以聽(tīng)到45分貝(接近正常說(shuō)話的聲音)左右的聲音，他們的聽(tīng)力可能達(dá)到了正常聽(tīng)力的60%-65%。其中首位接受治療的患兒的聽(tīng)力恢復(fù)已經(jīng)持續(xù)一年多，而且可以日常對(duì)話。

舒易來(lái)醫(yī)生對(duì)《生物世界》表示，在6名接受治療的患兒中，有1人的聽(tīng)力沒(méi)有得到明顯改善，這可能是由于他之前有感染過(guò)AAV病毒(這種感染在人群中并不罕見(jiàn))，AAV是一類(lèi)非致病性病毒，但仍會(huì)引起人體的免疫反應(yīng)。這名患兒體內(nèi)的AAV抗體水平較高，可能導(dǎo)致了注射的AAV被他體內(nèi)的抗體中和，也可能是AAV從注射部位泄漏，沒(méi)能有效進(jìn)入內(nèi)耳毛細(xì)胞內(nèi)。

該試驗(yàn)中的基因療法由復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院舒易來(lái)、李華偉團(tuán)隊(duì)與哈佛大學(xué)麻省眼耳鼻喉醫(yī)院陳正一團(tuán)隊(duì)合作，并與上海鼎新基因科技有限公司共同開(kāi)發(fā)，這也是全球第一項(xiàng)獲得臨床療效的內(nèi)耳基因治療和雙AAV載體的人體試驗(yàn)(Frist in Human)。而在2023年10月，舒易來(lái)醫(yī)生受邀在第30屆歐洲基因和細(xì)胞治療學(xué)會(huì)(ESGCT)年會(huì)上分享了這項(xiàng)臨床試驗(yàn)的數(shù)據(jù)。該療法已于近期獲得美國(guó)FDA的罕見(jiàn)兒科疾病認(rèn)定(RPDD)和孤兒藥認(rèn)定(ODD)。

舒易來(lái)醫(yī)生在2023 ESGCT年會(huì)上分享耳聾基因治療臨床試驗(yàn)進(jìn)展

值得一提的是，該論文上線時(shí)，禮來(lái)在官網(wǎng)公布了其全資子公司Akouos開(kāi)發(fā)的AAV-OTOF基因療法的早期積極臨床結(jié)果，1名11歲的患兒在接受治療后30天內(nèi)聽(tīng)力得到了明顯改善，且耐受性和安全性良好。

舒易來(lái)團(tuán)隊(duì)等在《柳葉刀》發(fā)表的這項(xiàng)臨床結(jié)果，展現(xiàn)了基因療法在先天性耳聾治療中的巨大潛力，開(kāi)啟了耳聾基因治療新時(shí)代，為進(jìn)一步開(kāi)展耳聾基因治療的臨床試驗(yàn)注入了一劑強(qiáng)心針，也說(shuō)明了中國(guó)學(xué)者在這一前沿領(lǐng)域取得了領(lǐng)先地位。

復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院的呂俊博士生、王會(huì)博士、程曉婷主治醫(yī)師、陳玉鑫助理研究員以及王大奇助理研究員為該論文的共同第一作者，復(fù)旦大學(xué)附屬眼耳鼻喉科醫(yī)院舒易來(lái)教授、李華偉教授、王武慶教授，哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院陳正一教授、東南大學(xué)柴人杰教授為論文共同通訊作者。同該研究還得到了上海鼎新基因科技高凱瑜博士以及醫(yī)院工作人員、團(tuán)隊(duì)其他成員的大力支持。該研究主要由國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目、國(guó)家重點(diǎn)研發(fā)計(jì)劃項(xiàng)目、上海市科科學(xué)技術(shù)委員會(huì)項(xiàng)目以及上海鼎新基因科技有限公司資助完成。

論文鏈接：

https://www.thelancet.com/journals/lancet/article/PIIS0140-6736(23)02874-X/fulltext