01 選取實驗動物
動物實驗設計首先要考慮如何選擇合適的實驗動物,以確保達到預期實驗目的。選擇疾病實驗動物要遵循“相似性原則”、“特異性原則”、“標準化原則”、“適宜規格原則”、“經濟易獲性原則”等。
相似性原則是要求選擇實驗動物時盡量選擇與人體結構、功能、代謝及疾病特征相似的動物;
特異性原則是要求盡量選取解剖、生理特點符合實驗目的的動物;
標準化原則是指實驗動物遺傳背景明確,模型性狀顯著且穩定;
適宜規格原則是指根據實驗目的選擇實驗動物,需考慮實驗動物的年齡、體重、性別、生理狀況以及品種品系。
除此之外,盡量選擇結構簡單又能反映研究指標、經濟容易獲得的實驗動物。
02 實驗動物前準備
在 整 個 實 驗 過 程 中 要 嚴 格 遵 循 “3R”原 則 , 即替代(Replacement)、減少(Reduction)、優化 (Refifinement)。3R原則是一種讓研究者科學合理的利用實驗動物的方法,目的是在不影響實驗要求和結果的基礎上,盡量減少實驗動物的痛苦。在實驗開始前,完善實驗設計,選取合適實驗室,準備實驗動物飼料、飲水、墊料等,購買合適的實驗動物開展實驗。
03 實驗動物編號
實驗動物編號方法很多,根據動物的種類數量和觀察時間長短等因素選擇合適的標記方法。目前比較常見的編號方法有掛牌法、打號法、針刺法、染色法、打耳孔法、耳標法、電子芯片法、紋身法等。
04 實驗動物分組原則
動物分組要遵循“隨機分配”原則,使每只動物都有同等機會被分配到各個實驗組和對照組中,避免出現誤差,影響實驗結果。隨機分配一般有配對比較法隨機分組、隨機區組法隨機分配以及完全隨機分組這幾種方法。
實驗動物分組一般有對照組和實驗組之分,這里介紹一下常用的對照組。
常用對照組
自身對照組:實驗動物在實驗處理前、后階段的實驗數據就分別是對照組和實驗組的實驗結果,設置自身對照組是為了排除個體差異。
平行對照組:可以是陽性對照組、陰性對照組、空白對照組。
陽性對照組:是指實驗動物采用已知有效的實驗手段或藥物;
陰性對照組:是指與實驗組采用同樣的方法處理,但不采用實驗所需的藥物或實驗手段;
空白對照組:是指不采用任何處理。
05 實驗動物數量
每組的實驗動物數量也會影響整個實驗結果,選取合適的每組動物數量會取得比較好的實驗數據。這里列舉幾種常見實驗動物的選取建議,小型動物經濟易獲得,在選擇此類實驗動物時,每組動物數量可以稍微多一些;大型動物一般不易獲取,價格也更為昂貴,動物數量要保持最低要求。每組的實驗動物數量要根據實驗周期長短、類型以及統計學要求而定,如果是慢性實驗或定期處死動物的實驗,準備足夠的動物數量彌補死亡后的動物數,保持足夠的樣本量。
嚙齒類動物:比如小鼠、大鼠,建議按每組8~10只,越多越好。
大型動物:比如猴子、豬、狗等,建議每組至少5只。
總之,選擇動物時應盡可能選用與人在生物學上接近,在機體解剖、生理功能相類似的動物,應選用敏感動物品系,選用靶器官高效應實驗動物。同時,注意動物的年齡、性別、遺傳、營養、環境等因素。對于不同種屬動物的采血方式和采血量,在最大程度保護動物權益的前提下,基于相應的基本原則,大家可以自行選擇與調整。
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