1. AAV適合做基因過表達還是敲低？

AAV主要用于基因過表達，也可通過shRNA、miRNA或CRISPR系統實現基因敲低或敲除。

2. AAV的最大包裝容量是多少？

AAV最大包裝容量約為4.7 kb，超過該長度會降低滴度和轉導效率。

3. AAV可以攜帶熒光標簽嗎？

可以，如GFP、mCherry、tdTomato等，用于評估轉導效率和表達定位。

4. 如何選擇AAV血清型？

需根據靶組織、給藥方式及物種選擇，如AAV9適用于中樞神經系統及全身遞送。

5. AAV常見給藥方式有哪些？

包括尾靜脈注射、腦立體定位注射、肌肉注射及眼內注射。

6. AAV如何保存？

建議-80°C保存，避免反復凍融，推薦分裝。

7. 使用前如何處理AAV？

冰上緩慢融化，輕柔混勻，避免劇烈吹打。

8. AAV最佳檢測時間？

通常1–2周可見明顯表達，3–4周達到穩定表達。

9. 是否需要細胞預實驗？

建議進行體外驗證，以降低動物實驗失敗風險。

10. 如何提高AAV表達效率？

優化啟動子、提高劑量、選擇合適血清型并延長表達時間。

11. 為什么表達效果不理想？

可能與啟動子不匹配、血清型選擇不當、劑量不足或檢測時間過早有關。

12. AAV是否整合到基因組？

主要以游離形式存在，整合概率極低。

13. AAV是否具有免疫原性？

免疫原性較低，但高劑量或重復給藥可能引發免疫反應。

14. AAV可以用于CRISPR嗎？

可以，通常采用小型Cas9或雙AAV系統。

15. AAV與LNP有何區別？

AAV適用于長期表達，LNP適用于短期mRNA遞送。