是的,我們可以將基因編輯用的 mRNA 和 sgRNA 一同包封在 LNP 中。我們已成功將 SpCas9 mRNA 與 sgRNA 共同包封,并在 Huh7 細胞中實現了顯著的基因編輯效率。我們推薦使用 LP01 配方,并將在測試其他配方后持續更新相關信息。
我們使用線性化的質粒 DNA 作為 mRNA 生產的模板。基因序列可以由我們團隊通過派真生物的專有載體和設計工具進行構建,也可以由您自行提供。一旦序列設計確認無誤,我們將負責整個基因合成及 mRNA 制備流程,并按照服務協議交付最終的 mRNA 產品。
是的,我們可通過與 Kudo Biotechnology 的合作提供 cGMP 級別的 mRNA。如需了解更多信息,歡迎訪問我們的 GMP mRNA 服務頁面。請查閱我們的 GMP mRNA 頁面獲取詳細內容。
所需的 mRNA 劑量取決于目標表達水平以及靶向的細胞或組織類型。在小鼠注射實驗中,我們曾使用每千克體重 0.5 mg 的 FLuc 或 EGFP mRNA(以 LNP 包封形式),可獲得較強的表達效果。對于具體目標基因,建議嘗試多個劑量進行優化,以確定最佳使用量。
通常情況下,我們建議在 6 孔板中每孔使用 0.5?μg 至 2.5?μg 的 mRNA(每孔約含 2?mL 培養基和 1.0–3.5 × 10? 個細胞)。在 24 孔板中轉染時,每孔一般使用 0.5?μg 至 1?μg 的 mRNA。
是的,我們可以對客戶提供的 mRNA 進行質量檢測。請參考我們提供的 mRNA 質量控制(QC)檢測項目,詳見此頁面。
為了檢測 poly(A) 尾的長度,我們會使用 RNase 或其他水解試劑對 mRNA 樣本進行酶解處理,將其降解為較小的片段,并釋放出富含腺苷的 poly(A) 尾序列。隨后,通過液相色譜-質譜聯用(LC-MS)對這些片段進行定量分析。
可以,我們可以將您之前訂單中的 ORF 序列亞克隆至我們專有的 mRNA 載體中,該載體包含 T7 啟動子、UTR 以及 110 個腺苷酸的 poly(A) 尾,用于后續的 mRNA 生產。
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